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洗涤细胞怎么洗

洗涤细胞怎么洗

介绍

洗涤细胞是分离细胞后去除杂质、细胞残留物,以获得纯净的细胞。洗涤细胞是实验室操作中一个常见的步骤,为了保证实验结果的准确性和重复性,需要掌握正确的洗涤细胞方法,本文将介绍几种常见的洗涤细胞方法和步骤。

方法一:离心洗涤法

离心洗涤法是从培养皿或管中抽取细胞悬液,向离心管内倒入含有PBS等缓冲液的溶液,离心沉淀细胞,倒去上清液。重复以上步骤数次,既可去除悬浮于细胞周围的杂质和含有病原体的培养液。

方法二:用纯化水洗涤法

将细胞悬液加入离心管中,用纯化水替换原液,轻轻摇动离心管,使细胞泡沫碎裂并与水混合。再将细胞沉淀转移至新管内,用去离子水洗涤细胞至少三遍,以去除所有的杂质和化学残余物.最后用吹风机等低温干燥设备将离心管内的细胞干燥。

方法三:差速离心洗涤法

差速离心洗涤法是利用离心机加速高速离心,可以去除细胞表面上黏附的其它细胞(如噬菌体),细胞壁残余等. 首先将待测细胞样品加入离心管内,缓慢离心(400 g,5分钟),去除上清液后倒入PBS缓冲液,使其再均匀沉淀,然后在600g 5分钟的离心干燥离心,离心后取上清液,再继续离心,反复重复到细胞洗涤至清洁为止,最后以高速离心沉淀细胞即可。

注意事项

1. 选择合适的洗涤缓冲液对细胞产生最小的干扰。2. 离心管或离心机需要保持清洁,以免对实验产生干扰。3. 操作时,需要注意温度、速度等因素对细胞的影响。4. 获得的洗涤细胞需要及时处理,以免产生误差。

总结

洗涤细胞的方法不同,在实验操作过程中要根据需要选择合适的方法。洗涤细胞的目的是为了获得高纯度的细胞,洗涤时需要注意消除干扰因素,保持操作规范,以保证实验结果的准确性和重复性。